摘要：探讨SIRT1-TSC2信号通路在人参皂苷Rg1诱导白血病干细胞衰老中的作用。运用免疫磁性分选法分离纯化CD34+CD38-白血病干细胞(CD34+CD38-LSCs),分选的CD34+CD38-LSCs分为对照组和Rg1组,对照组常规培养,Rg1组在对照组基础上加入40μmol·L-1人参皂苷Rg1共培养。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、流式细胞周期分析、CCK-8和Colony-Assay法检测确定Rg1作用后CD34+CD38-LSCs衰老生物学改变。荧光定量PCR及Western blot法检测衰老调控分子SIRT1,TSC2 mRNA及蛋白的表达。结果显示,免疫磁性分选后CD34+CD38-LSCs纯度达(95.86±3.04)%。Rg1诱导作用后,与对照组比较,Rg1组CD34+CD38-LSCs SA-β-Gal染色阳性率增高,CD34+CD38-LSCs出现衰老形态学改变;Rg1组CD34+CD38-LSCs增殖抑制率增高,停滞于G0/G1期细胞比例增多,形成集落数量下降,Rg1能显著抑制CD34+CD38-LSCs增殖和自我更新能力;Rg1组CD34+CD38-LSCs SIRT1和TSC2 mRNA及蛋白表达较对照组下调。该研究结果表明,Rg1能有效诱导CD34+CD38-LSCs衰老,SIRT1-TSC2信号通路在其中发挥重要调控作用。

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