摘要:目的:研究TGF-β2对胶质瘤干细胞侵袭能力的影响及其可能机制。方法:收集2016年4月至2017年4月中国医科大学附属第一医院神经外科手术切除的8例人多形性成胶质细胞瘤组织标本,通过胰蛋白酶消化法进行胶质瘤细胞原代培养,部分胶质瘤细胞加入含有EGF、bFGF、B27的DEME/F12培养基中进行无血清培养获得悬浮生长的肿瘤细胞球,免疫荧光染色及分化实验验证肿瘤球是否为胶质瘤干细胞。ELISA方法检测胶质瘤干细胞分泌TGF-β2的水平,转染TGF-β2 siRNA后应用Transwell方法检测TGF-β2对胶质瘤侵袭能力影响,Western blotting检测TGF-β2对胶质瘤干细胞中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)表达影响。结果:通过免疫荧光染色及分化实验证明原代培养的悬浮生长肿瘤细胞球为胶质瘤干细胞,肿瘤细胞球表达CD133,在含血清培养基中可以分化为神经元和胶质细胞。胶质瘤干细胞比原代培养的胶质瘤TGF-β2分泌水平明显升高[(74.13±3.63)vs(46.13±2.61)pg/ml,P〈0.05]。沉默TGF-β2可以降低胶质瘤干细胞侵袭细胞数[(105.71±8.69)vs(63.67±5.93)个,P〈0.05],并抑制MMP-2和MMP-9表达(均P〈0.05)。结论:TGF-β2通过MMP-2和MMP-9通路增强胶质瘤干细胞的侵袭能力。
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