摘要:目的:探讨人工合成小分子双链RNA-625(double-stranded RNA-625,ds P21-625)对前列腺癌细胞P21基因的激活作用及对细胞增殖的影响。方法:将人工合成的ds P21-625(ds P21-625组)和ds Ctrl质粒(ds Ctrl组)分别转染至前列腺癌细胞株PC-3和DU-145。用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测转染后各组前列腺癌细胞中P21、细胞周期素E(Cyclin E)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)m RNA及蛋白的表达水平,流式细胞术、MTT实验和克隆形成实验分别检测细胞周期分布、细胞增殖和克隆形成能力。结果:与ds Ctrl组比较,ds P21-625组PC-3和DU-145细胞中P21 m RNA水平升高(均P〈0.01),Cyclin E和CDK2 m RNA表达水平下调(均P〈0.01);ds P21-625组PC-3和DU-145细胞中P21蛋白表达上调(均P〈0.01),Cyclin E和CDK2蛋白表达下调(均P〈0.01);ds P21-625组细胞S期和G2/M期的细胞比例减少(均P〈0.05),G0/G1期的细胞比例增加(均P〈0.01);ds P21-625组细胞增殖活力降低(均P〈0.05)、克隆形成数减少(均P〈0.05)。结论:ds P21-625上调前列腺癌细胞中P21 m RNA及蛋白的表达,下调Cyclin E和CDK2 m RNA及蛋白的表达,抑制前列腺癌细胞的增殖能力。
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