首页 期刊 中国肿瘤生物治疗 miRNA-486-5p对胃癌细胞SGC7901中NRP2表达的影响 【正文】

miRNA-486-5p对胃癌细胞SGC7901中NRP2表达的影响

作者:连海峰 李明 刘成霞 李锟 李丹 滨州医学院附属医院消化内科 山东滨州256603 滨州医学院护理学院内科护理学教研室 山东滨州256603
胃癌   生物信息学技术   神经纤毛蛋白2   转染  

摘要:目的:预测并鉴定miRNA-486-5p在人胃癌细胞SGC7901中的靶基因及其表达。方法:采用生物信息学技术预测miRNA-486-5p的作用靶点,构建miRNA-486-5p过表达质粒(GV214-miR)并转染入SGC7901细胞(SGC7901-miR)中,以空质粒转染SGC7901细胞(SGC7901-miR-NC)为阴性对照,以SGC7901细胞为空白对照。Real-time PCR检测转染细胞中miRNA-486-5p及其靶基因神经纤毛蛋白2(neuropilin-2,NRP2)mRNA的表达,Western blotting检测NRP2的表达,双荧光素酶实验验证miRNA-486-5p对NRP2基因的调控机制。结果:经生物信息学预测,选择与胃癌生物学行为密切相关的NRP2作为miRNA-486-5p的靶基因。与空白组相比,GV214-miR转染后的SGC7901细胞miRNA-486-5p表达显著上调[(8.21±1.18)vs(1.02+0.26),P〈0.01],NRP2 mRNA表达无明显变化(P〉0.05),而NRP2蛋白表达则明显下调[(0.36±0.06)vs(0.76±0.05),P〈0.05],双荧光素酶实验证实miRNA-486-5p可与NRP2 mRNA 3’-UTR直接结合,从而发挥对NRP2转录后翻译的抑制作用。结论:miRNA-486-5p在胃癌细胞SGC7901中可直接作用于NRP2 mRNA 3’UTR,从而抑制其表达。

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