摘要：目的：构建丙型肝炎病毒（HCV）NS5A蛋白原核表达载体，获得高产量的纯化目的蛋白，并制备其多克隆抗体。方法：应用聚合酶链反应技术，PCR扩增获得NS5A基因，将NS5A基因插入至原核表达载体pET-32a（＋）中，转化大肠埃希菌DH5α提取质粒，验证正确后，转化大肠埃希菌BL21中，以IPTG诱导，获得NS5A融合蛋白的可诱导性表达．通过SDS—PAGE电泳、Western blot免疫印迹分析证实融合蛋白表达的特异性。利用Ni^＋亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性。纯化蛋白免疫新西兰兔，利用Western blot和ELISA法对多克隆抗体进行特异性和效价检测。结果：NS5A融合蛋白表达成功，成功获得了融合蛋白及兔抗NS5A多克隆抗体。结论：成功表达NS5A基因融合蛋白．获得高特异性、兔抗NS5A多克隆抗体，为研究NS5A基因的生物学功能提供了重要制剂。

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