首页 期刊 中国医学装备 PLEKHQ1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞永生化细胞系的建立 【正文】

PLEKHQ1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞永生化细胞系的建立

作者:张鹏飞; 张硌; 陆琤; 周晨辰 解放军307医院医学工程科; 北京100071
基因plekhq1   sv40大t抗原基因   慢病毒感染   胚胎成纤维细胞   永生化  

摘要:目的:建立PLEKHQ1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)永生化细胞系,为全面研究PLEKHQ1基因功能提供细胞实验材料。方法:采用慢病毒感染的方法将猿猴病毒40(SV40)大T抗原基因导入已鉴定出基因型的MEF中,建立永生化细胞系;利用聚合酶链反应(PCR)检测SV40大T抗原基因在MEF中的整合情况,利用反转录PCR及凝胶成像的方法观察SV40大T抗原基因在MEF中的表达。结果:SV40大T抗原基因已整合至MEF中,且此类MEF已扩大培养及稳定传代半年之久。结论:成功建立的PLEKHQ1基因敲除MEF永生化细胞系,可为进一步研究PLEKHQ1基因功能提供细胞实验材料。

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