首页 期刊 中国药科大学学报 抗重组人红细胞生成素单克隆抗体的制备与鉴定 【正文】

抗重组人红细胞生成素单克隆抗体的制备与鉴定

作者:唐祖明; 梅茜; 郑纪山; 陆祖宏 东南大学分子与生物分子电子学实验室; 南京; 210096; 南京军区军事医学研究所; 南京; 210002
重组人红细胞生成素   单克隆抗体   抗原决定簇   酶联免疫吸附分析   制备  

摘要:目的:获得能特异性识别人红细胞生成素(hEPO)的单克隆抗体(McAb).方法:用重组人红细胞生成素(rHuEPO)作抗原免疫Balb/c小鼠,以细胞融合、酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选和克隆化技术获得抗hEPO的杂交瘤细胞株.用生物学方法鉴定杂交瘤细胞,用免疫学方法鉴定McAb的特异性.结果:获得3株稳定分泌抗hEPO-McAb的杂交瘤细胞株(1H7、4G11、1B4). 培养上清的ELISA效价分别为:1∶1 024、1∶512、1∶512 ;腹水效价为: 1×107、1×106、2×104.阻断法表明1H7识别的hEPO上的抗原决定簇和4G11、1B4识别的不同.结论:成功建立了3株稳定分泌抗hEPO-McAb的杂交瘤细胞株,它们分别识别hEPO上2个不同的抗原位点,有望作为EPO定量检测的特异性抗体.

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