首页 期刊 中国预防兽医学报 猪A群轮状病毒VP6蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定 【正文】

猪A群轮状病毒VP6蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定

作者:韩斆 陈建飞 时洪艳 张鑫 石达 迟延彬 李长龙 冯力 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室 黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学生命科学学院 黑龙江哈尔滨150030
a群轮状病毒   vp6蛋白   单克隆抗体   抗原表位  

摘要:为制备猪A群轮状病毒(RV)VP6蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究以原核表达、纯化的重组VP6蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,rVP6-GST为包被抗原,通过间接ELISA筛选出一株稳定分泌抗VP6蛋白的MAb杂交瘤细胞株(1F4).MAb鉴定结果显示其抗体亚类为IgG1型,轻链为κ链;细胞上清液及腹水效价分别为1:12 800和1:106.Westem blot和间接免疫荧光结果显示该MAb能够与天然的VP6蛋白反应.应用肽扫描技术鉴定显示该MAb对应抗原表位核心序列为134DYIENWNLQNW44.该MAb的制备为进一步研究VP6蛋白功能和建立RV检测方法奠定基础.

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