首页 期刊 中国畜牧兽医 猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测 【正文】

猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测

作者:郑仲华 李东升 姚俊庸 常艳 勾红潮 刘文俊 赵明秋 毛晶丹 陈金顶 华南农业大学兽医学院 广东广州510642
猪瘟病毒c株   a   d主要抗原区   截短表达  

摘要:本试验利用PCR技术,扩增得到猪瘟病毒(CSFV)C株E2基因的主要抗原片段A/D区549bp,将其酶切纯化后,与已酶切纯化的pET-32a进行16℃过夜连接,转化大肠杆菌BL21。从转化成功的氨苄培养板挑取合适菌落进行PCR,挑取目的条带正确的菌落加至LB培养基进行过夜培养后送测序。将测序正确的菌液划板,挑菌培养并用IPTG进行诱导表达。得到的蛋白进行SDS-PAGE,在约39ku位置有蛋白条带。将蛋白纯化后,分别利用自制兔抗CSFV阳性血清及临床检测阳性的猪抗CSFV阳性血清进行Westernblotting检测,可见在39ku处有单一条带,表明表达的蛋白具有免疫原性。本试验结果为下一步ELSIA试剂盒的组装奠定基础,方便对猪场免疫猪群猪瘟抗体水平进行监控。

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