首页 期刊 中国修复重建外科 KLD-12多肽/重组人BMP-2凝胶诱导兔BMSCs成骨活性的实验研究 【正文】

KLD-12多肽/重组人BMP-2凝胶诱导兔BMSCs成骨活性的实验研究

作者:吴彬; 陈磊; 李相晨; 于洪涛; 杨海; 梁相辰; 孙建华; 董金波 石河子大学医学院第一附属医院骨科中心; 新疆石河子832008
bmscs   成骨活性   兔  

摘要:目的探讨KLD-12多肽复合重组人BMP-2(recombinant human BMP-2, rhBMP-2)诱导兔BMSCs成骨活性的影响。方法取3月龄新西兰大白兔骨髓,采用密度梯度法分离培养BMSCs。取第3代BMSCs分别采用KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶三维培养(实验组)和KLD-12多肽凝胶培养(对照组)。培养7d倒置相差显微镜下观察实验组细胞在凝胶内的形态;3、7、10、14、21d检测两组细胞培养基中ALP及骨钙蛋白含量;培养14d两组行I型胶原免疫荧光染色观察,实时荧光定量PCR检测I型胶原和骨钙蛋白基因相对表达量。结果倒置相差显微镜下观察,培养7d实验组及对照组凝胶内BMSCs呈圆形,分布均匀。两组培养3、7d时ALP表达量及骨钙蛋白含量比较差异无统计学意义(P〉0.05),10~21d实验组以上指标均明显高于对照组(P〈0.05)。培养14d。激光共聚焦显微镜观察示,实验组I型胶原免疫荧光染色阳性,且荧光强度较对照组高;实时荧光定量PCR检测实验组I型胶原、骨钙蛋白基因相对表达量均显著高于对照组,比较差异有统计学意义(t=15.902,P=O.000;t=12.998。P=0.000)。结论BMSCs在KLD-12多肽内正常生长并增殖,KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶诱导BMSCs向成骨细胞分化的生物活性良好。

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