首页 期刊 中国细胞生物学学报 利用冰核蛋白N-端结构域在大肠杆菌表面展示人存活蛋白 【正文】

利用冰核蛋白N-端结构域在大肠杆菌表面展示人存活蛋白

作者:罗砚曦; 蒋依俐; 阎辉 浙江省医学科学院药物所; 杭州310013; 杭州师范大学医学院; 杭州310013
冰核蛋白   存活蛋白   表面展示   dna疫苗  

摘要:存活蛋白(survivin)是高度特异的广谱肿瘤相关抗原,利用冰核蛋白(ice nucleation protein,INP)表面展示系统研究在大肠杆菌细胞表面展示人存活蛋白的可行性。将人存活蛋白基因片段和报告基因Cherry融合到冰核蛋白N-端,构建表面展示载体p ET-INP-CHY-SUV并转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌经IPTG诱导后可检测到红荧光,荧光强度在胰蛋白酶的作用下降低,完整细胞ELISA实验及免疫荧光实验可检测和观察到绿荧光,表明人存活蛋白在重组菌中得到表达,并且成功展示于细胞表面,为进一步研制新型的肿瘤DNA疫苗奠定基础。

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