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甘胆酸均相酶免疫检测方法的建立及性能评估

作者:韩钟; 陈青松 嵊州市人民医院; 浙江嵊州312499; 浙江夸克生物科技有限公司; 浙江新昌312500
甘胆酸   均相酶免疫法   竞争法   性能评估  

摘要:目的建立一种均相酶免疫检测甘胆酸( glycocholic acid hydrate ,CG)方法。方法采用竞争法,均相酶免疫分析技术,建立甘胆酸( CG)均相酶免疫检测方法,并对本方法进行了检出限、精密度、准确度、线性、干扰和相关性试验。结果本法试剂最佳pH值为7.8,最优兔抗人甘胆酸多克隆抗体浓度为25μg/ml。检测限为0.3μg/ml;精密度用低、高2种浓度的质控品检测,重复性精密度分别为3.43%、2.12%,中间精密度分别为5.43%、4.06%;准确度检测低、高2种浓度的质控品,相对偏差分别为-5.71%、-2.42%;线性范围为0.00μg/ml~50.00μg/ml。3种干扰物在试验浓度内(胆红素≤800μmol/L,血红蛋白≤0.500 g/L,维生素C≤6 mmol/L)的偏差分别为3.2%、2.2%、1.6%。与甘胆酸(CG)放射免疫检测试剂盒的决定系数(r^2)为0. 992。以放射免疫法为标准,均相酶免疫法敏感度为97. 53%,特异度为83.33%,符合率为94.95%。结论该研究建立了CG均相酶免疫检测方法,其测定结果准确、稳定、可靠,与参比试剂盒的测定结果具有较高的相关性。

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