摘要：目的：采用细胞核酸释放剂（Cell nucleic releaser,CNR）,建立在同一PCR扩增管内同时进行细胞核酸提取和荧光PCR扩增的白细胞HBV DNA检测技术。方法：白细胞的处理：新鲜抗凝（EDTA-Na2）全血0.2 ml,破碎红细胞,用生理盐水洗涤四次,弃净残液,加20μl白细胞温化剂制备成白细胞悬液。白细胞HBV DNA核酸提取与扩增：取3μl的CNR和等量的白细胞悬液在PCR扩增管底轻轻吹打混匀,覆盖30μl无菌石蜡油,37℃,60 s→99℃,7 min→37℃,30 s,直接加入已配制荧光PCR反应液,3000 g/min离心1 min,进行实时荧光定量PCR扩增。采用QiaGen的核酸提取方法作为对照。选择144例血清HBV DNA检测结果大于104IU/ml和131例血清无HBV DNA检出的乙肝患者标本为研究对象,20例非乙肝患者全白细胞作为特异性研究标本。结果：采用融红细胞的方法分离白细胞和CNR分离核酸,无白细胞和核酸丢失之嫌,可对全白细胞内的HBV DNA进行准确定量,该方法具有较好的灵敏性和重复性。与QiaGen核酸提取方法相关性良好（r=0.96）,144例血清HBV DNA大于104IU/ml的乙肝患者其白细胞全部大于100 IU/ml,131例血清HBV DNA阴性的乙肝患者有56例（42.7%）白细胞HBV DNA大于100 IU/ml。结论：基于CNR核酸提取方法的全白细胞HBV DNA定量技术,操作简单、且具有较好的敏感性和重复性,可作为研究白细胞内HBV DNA临床意义的检测手段。

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