摘要:目的探讨热休克培养对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)及Bcl-2、Bax、Caspase-3等凋亡相关蛋白的影响。方法 4周龄雄性SD大鼠处死后获取BMSCs,24h热休克培养,分别转染b FGF基因过表达腺病毒载体Ad-b FGF和空载体Ad-GFP,并设立阴性对照组,q RT-PCR和Western blot法分别鉴定3组细胞b FGF基因和蛋白的表达情况,Western blot法测定FGFRs、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况。结果转染后48h,RT-PCR和Western blot结果显示,转染Ad-b FGF组细胞有b FGF基因和蛋白表达,而阴性对照组和空载体Ad-GFP组未检测;Western blot结果表明,与阴性对照组和空载体Ad-GFP组相比,转染Ad-b FGF组FGFRs、Bcl-2表达增高,而Bax、Caspase-3表达下降,Bax/Bcl-2比值下降(P〈0.05),阴性对照组和空载体Ad-GFP组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论腺病毒介导的基因转染技术能实现b FGF转染到BMSCs中,借助于热休克培养能提高FGFRs表达水平,并增强细胞抗凋亡能力,有望成为基因治疗的理想载体。
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