摘要:目的 巨噬细胞的胞葬功能对维持机体生长发育及内环境稳定至关重要。本研究拟探讨,Nogo-B是否对巨噬细胞的胞葬功能具有调控作用及其可能机制。方法 将J774A.1小鼠巨噬细胞株分为siRNA阴性对照组与Nogo-B siRNA干扰组,采用紫外线法诱导HL60细胞凋亡。分别以绿色与红色荧光celltracker对巨噬细胞与凋亡细胞进行染色并共同孵育,免疫荧光显微镜下观察巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬指数变化;对巨噬细胞给予凋亡细胞刺激,于刺激5、10及15min采集巨噬细胞提取蛋白,谷胱甘肽巯基转移酶-拉下实验法检测Rac1GTPase活性变化。结果 采用siRNA转染下调Nogo-B表达后巨噬细胞的胞葬功能明显受损,其对凋亡细胞的吞噬指数由对照组的(48.9±3.5)%显著降低至Nogo-B siRNA组的(17.8±2.1)%(P〈0.01);下调Nogo-B表达后的巨噬细胞,在凋亡细胞刺激下Rac1GTPase活性无显著变化,即出现Rac1GTPase激活障碍,而对照组巨噬细胞在凋亡细胞刺激下Rac1GTPase被逐渐激活。结论 Nogo-B对巨噬细胞的胞葬功能具有调控作用。下调Nogo-B表达后巨噬细胞的胞葬功能明显受损;Nogo-B可能通过Rac1GTPase激活途径,影响细胞骨架重组,发挥对胞葬功能的调节作用。
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