摘要:收集水牛孤雌激活后2细胞期早期胚胎500枚,利用0.1%链酶蛋白酶去除透明带后提取蛋白质,并使用胰蛋白酶进行酶解处理,再将酶解得到的多肽混合物经强阳离子交换色谱进行顸分离,预分离后所收集的馏分通过液相色谱串联质谱(LC—MS/MS)技术进行质谱鉴定,原始数据通过数据库搜索获得该时期蛋白质表达谱0通过SE-QUEST检索共得到778种蛋白,对其进行生物信息学初步分析,包括G0富集分析和蛋白互作网络分析等。结果发现,这些蛋白质主要参与氧化还原、蛋白质折叠、细胞内蛋白质运输等生物学过程,主要定位于线粒体和细胞膜上。本研究为后续以孤雌激活为研究模型探讨哺乳动物早期胚胎发育和母源性蛋白质调控机制提供了新的研究手段和方法。
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