首页 期刊 中国兽医学报 鹅细小病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及临床应用 【正文】

鹅细小病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及临床应用

作者:王艳秋; 张紫璇; 高旭; 李卓昕; 王关琪; 刘晋宇; 鲁承; 梁晚枫; 于龙政; 王妍 延边大学农学院; 吉林延吉133000
鹅细小病毒   vp3基因   实时定量pcr   taqman荧光探针  

摘要:为了建立一种能定量检测鹅细小病毒(GPV)的荧光定量PCR方法,根据GenBank已收录GPVVP3基因保守区设计1对特异引物和TaqMan探针,经反应条件优化、标准曲线建立,以及敏感性、特异性和重复性试验。结果显示,该方法在10^7~10^2拷贝/μL具有良好的线性关系(R^2=0.999);灵敏度是普通PCR方法的100倍;对其他3种常见禽病毒无特异性扩增,具有较好的特异性;组内与组间的变异系数均小于2%,具有良好的重复性。对临床20份疑似GPV感染鹅病料进行检测,检出率比普通PCR高10%。表明本试验建立的TaqMan荧光定量PCR方法准确、稳定、灵敏和特异,可以用于GPV临床定性与定量检测。

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