摘要：为了检测、区分猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED),建立了同时检测这2种疾病病原体的多重PCR方法.参考GenBank登录的TGEV和PEDV纤突蛋白S基因序列,经DNAsis 2.0比较分析,分别筛选出TGEV、PEDV S基因相对保守区.以TGEV TH-98株(GenBank登陆号为AF494337)和PEDV CV777株(GenBank登陆号为NC003436)为参考模板,利用软件Primer 3设计合成了2对寡核苷酸引物,以ST细胞培养的TGEV和PEDV毒株核酸为模板,利用所设计的2对引物进行多重RT-PCR扩增,结果同时得到与试验设计相符的499 bp(TGEV)和199 bp(PEDV)的扩增条带,而对其他3种猪病原的扩增结果均为阴性.敏感性试验结果表明,建立的多重RT-PCR方法可检测出10pgTGEV RNA和100pgPEDV RNA.

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