首页 期刊 中国兽医科学 CELO病毒fiber1基因部分片段的原核表达及抗原性鉴定 【正文】

CELO病毒fiber1基因部分片段的原核表达及抗原性鉴定

作者:王凤雪; 王云峰; 智海东; 王玫; 童光志 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001
鸡胚致死孤儿病毒   fiberl基因   原核表达   抗原活性   诊断试剂盒  

摘要:根据鸡胚致死孤儿(CELO)病毒Phelps株的fiberl基因(GenBank序列号u46933)序列设计了1对引物,采用PCR扩增CELO病毒fiberl基因C端(包含Knob—S区)的部分片段,并将其克隆到质粒表达载体pGEX-6P—1,获得的阳性克隆命名为pGEX—AF807。序列分析表明,所获得的DN段核苷酸序列与CELO病毒Phelps株的fiberl基因序列完全一致。将pGEX—AF807转化大肠埃希氏菌DH5a,经37C、0.6mmol/L IPTG诱导表达5h,SDS—PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀。结果显示,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.6ku,目的蛋白量占菌体总蛋白的35.7%。用CELO病毒多克隆血清做Western blotting试验,结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性。

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