首页 期刊 中国实验方剂学 白藜芦醇延缓心肌微血管内皮细胞衰老的作用机制 【正文】

白藜芦醇延缓心肌微血管内皮细胞衰老的作用机制

作者:王强; 修成奎; 雷燕; 杨静 中国中医科学院望京医院; 北京100102; 中国中医科学院医学实验中心; 北京100700
白藜芦醇   内皮衰老   heat   shock   protein  

摘要:目的:探讨白藜芦醇延缓人心脏微血管内皮细胞衰老的作用,从细胞骨架角度分析其作用机制。方法:通过热休克蛋白27(HSP27)shRNA细胞系的建立,将组别为8代复制性衰老模型组(衰老组),白藜芦醇组(10μmol·L-1),空载质粒(Mock)组,HSP27shRNA组,HSP27shRNA+白藜芦醇组(10μmol·L-1)。运用β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老,细胞计数(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力,激光免疫共聚焦显微镜观察纤维状肌动蛋白(F-actin)和球型蛋白单体(G-actin)的形态学改变,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测F-actin蛋白的表达情况。结果:与衰老组比较,白藜芦醇组β-半乳糖苷酶染色比例下降(P〈0.01),细胞增殖能力增加(P〈0.01),F-actin线条较为完整的分布于细胞边缘,G-actin圆润饱满的分布于细胞中央,蛋白表达减少(P〈0.01);热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)沉默后,与Mock组比较,HSP27shRNA组及HSP27shRNA+白藜芦醇组β-半乳糖苷酶染色比例增加(P〈0.01),细胞增殖能力下降(P〈0.01),F-actin外周致密带边缘变得毛糙不规整,崩解消散,细胞的形状不能清晰的呈现;G-actin表现为边缘变模糊呈絮状向外延伸,而细胞中央区域染色离散,形态不规则,F/G-actin的平均光密度值下降(P〈0.01),蛋白表达减少(P〈0.01)。结论:白藜芦醇能够延缓内皮衰老,促进增殖,其中HSP27下调F-actin的表达可能是白藜芦醇延缓内皮衰老的重要机制所在。

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