摘要:将汉坦病毒H8205株G1P基因的保守序列(约1 000 bp)作为目的基因插入到Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的pFastBac HTb供体质粒中,利用Tn7转座子同Bacmid DNA同源重组,获得了含目的基因片段的重组杆状病毒DNA,并利用其转染Sf9昆虫细胞,72 h后收集细胞悬液,再用该悬液侵染Sf9昆虫细胞,48 h后收获病毒.采用IFA分析收获的产物,观察到了特异性的荧光,并且采用SDS-PAGE和Western印迹也获得了与预期一致的结果.证明感染后的Sf9昆虫细胞所表达的蛋白中含有能与抗汉坦病毒H8205株多克隆抗体特异性结合目的蛋白.研究表明,采用杆状病毒表达系统可以成功表达出汉坦病毒H8205株包膜糖蛋白G1基因片段,为开发适合的以G1P为抗原的汉坦病毒诊断试剂进行了前期的探索.
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