摘要:为了提高体外诱导ES细胞向心肌细胞分化的效率,对以往的诱导方法加以改进,采用直接悬浮培养和0.8%DMSO诱导,建立了简便、高效的定向诱导ES细胞向心肌细胞分化的体系.诱导第9 d起可见自发性、有节律跳动的类胚体出现,第14 d达到高峰,约有70%的拟胚体产生跳动.用RT-PCR的方法在跳动的拟胚体中检测到心肌细胞特异性标志物的表达,采用免疫荧光染色的方法在蛋白水平检测到心肌特异的α辅肌动蛋白(α-actinin)的表达,并可见清晰肌小节,表明在改进的体外诱导条件下ES细胞可分化为成熟的心肌细胞.
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