首页 期刊 中国生物化学与分子生物学报 抑制消减杂交分离肿瘤血管生成相关基因 【正文】

抑制消减杂交分离肿瘤血管生成相关基因

作者:刘海燕; 胡东; 冉宇靓; 遇珑; 孙立新; 刘军; 张新宇; 杨治华 中国医学科学院协和医科大学肿瘤研究所细胞及分子生物学研究室; 北京; 100021
肿瘤组织匀浆   脐静脉内皮细胞   cdna表达文库   抑制消减杂交   序列分析  

摘要:为获得肿瘤血管生成相关基因,以便为抗血管形成治疗肿瘤的新策略提供有价值的靶位,采用人新鲜的肝癌、肺癌组织匀浆活化人脐静脉内皮细胞(HUVEC),并构建了cDNA表达文库.利用抑制消减杂交(SSH)获得活化HUVEC高表达的基因片段,放射标记后筛选文库.获得的阳性克隆进一步进行差异杂交筛选,去除假阳性.共获得了177个阳性克隆,对其中74个克隆进行序列分析,发现它们代表32个基因,其中多个与肿瘤血管生成相关,1个为与细胞色素c氧化酶亚单位Ⅲ同源的新基因,2个为功能未知的假定蛋白基因.研究结果表明,用肿瘤组织匀浆模拟肿瘤内环境活化HUVEC,并通过比较活化前后基因表达谱的差异可以分离到肿瘤血管生成相关的基因.

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