摘要:人X盒结合蛋白1(XBP-1)为一种转录因子,与多种肿瘤的发生、发展有密切关系.XBP-1有2种剪切形式,即XBP-1S和XBP-1U.将这2种剪切形式中的一段相同编码序列(编码82~147位氨基酸)重组于谷胱甘肽s转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX-KG中,构建成重组质粒pGST-XBP-1(82~147位氨基酸).将该重组质粒转化E.coli DH5α后,表达GST-XBP-1(82~147位氨基酸)融合蛋白,经谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析获得纯化的融合蛋白.用此融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体.利用制备的抗体分别用Western印迹和免疫细胞化学检测XBP-1的2种剪切形式在哺乳动物细胞中的表达.结果表明,该抗体对XBP-1的2种剪切形式均具有反应原性,效价高,特异性好,可以用于进一步研究XBP-1的功能.
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