摘要：摘要高通量双向电泳是蛋白质组学的核心，双向电泳凝胶上蛋白质点的检测方法应具有灵敏度高、线性范围宽和兼容质谱鉴定等优点．采用差异凝胶电泳(difference gel electrophoresis，DIGE)技术以Cy3(1-(5-carboxypentyl)-1′-propylindocarbocyanine halide N-hydroxysuccinimidyl ester)和Cy5(1-(5-carboxypentyl)-1′-methylindodicarbocyanine halide N-hydroxysuccinimidyl ester)荧光分别标记正常和TNF-d处理细胞的蛋白质，用Cy2(3-(4-carboxymethyl)phenylmethyl)-3′-ethyloxacarbocyanine halide N-hydroxysuccinimidyl ester)荧光标记正常和TNF-α处理细胞蛋白质的等量混合样品作为内标，混合3种荧光标记的蛋白质后，在同一等电聚焦胶条进行聚焦，然后在聚丙烯酰胺凝胶上进行第二向电泳，用3种波长的激光激发扫描得到凝胶图象，DIGE中多个样品在同一条件下电泳，因而匹配率高，且引入内标使蛋白质点的检测与定量更为准确．DIGE技术与质谱相结合，实现了高通量和相对准确定量．与硝酸银和考马斯亮蓝染色结果相比较，DIGE技术具有灵敏度高、线性范围宽和不影响后续质谱鉴定等优点．

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