首页 期刊 中国生物工程 SARS冠状病毒复制酶蛋白nsp8的原核表达 【正文】

SARS冠状病毒复制酶蛋白nsp8的原核表达

作者:刘家森; 陈淑红; 刘怀然; 孟庆文; 庞海; 孔宪刚 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 哈尔滨; 150001; 东北农业大学动物医学学院; 哈尔滨; 150030; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 哈尔滨; 150001; 清华大学医学院; 北京; 100084
sails冠状病毒   复制酶   表达   sars冠状病毒   原核表达载体  

摘要:以SARS冠状病毒(BJ01株)基因组RNA为模板,经RT-PCR扩增得到SARS-CoV nsp8基因,并克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pNSP8E.pNSP8E转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达出可溶性的GST-nsp8融合蛋白,经亲和层析和自剪切获得了高纯度nsp8蛋白.以nsp8为抗原免疫家兔,制备了nsp8的多克隆抗体,为下一步研究其在病毒感染的细胞中的功能奠定了基础.

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