首页 期刊 中国生物工程 多花蔷薇总RNA提取方法 【正文】

多花蔷薇总RNA提取方法

作者:赵小兰; 苏晓华; 赵梁军 中国农业大学观赏园艺与园林系; 北京; 100094; 湖北民族学院生物科学与技术学院; 恩施; 445000; 中国林业科学研究院林业研究所; 北京; 100091; 中国农业大学观赏园艺与园林系; 北京; 100094
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摘要:根据总RNA完整性、纯度和得率筛选出适合多花蔷薇幼嫩根、叶总RNA的提取方法.结果表明,以CTAB/酸酚法提取的扦插苗根系总RNA、以LiCl-尿素法提取的扦插苗根、叶总RNA以及采用RNeasy Plant Mini Kit试剂盒的改进方法提取的组培苗嫩叶总RNA电泳有清晰明亮的28S、18S条带,无降解;其A260/A280值为1.73~2.04,表明总RNA质量好.RT-PCR结果进一步证实所提取的总RNA能够用于分子生物学的各种下游实验.RNA得率分别为:根系和组培苗嫩叶120-140μg/g(fw),扦插苗嫩叶190-230μg/g(fw).CTAB/酸酚法提取的嫩叶总RNA、SDS/酸酚法提取的根、叶总RNA有多糖污染,且有明显降解.Total RNA isolation system(Z5111,Promega)试剂盒不适合提取多花蔷薇各组织总RNA.

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