首页 期刊 中国生物工程 人apoA-I分泌型表达调控细胞模型构建 【正文】

人apoA-I分泌型表达调控细胞模型构建

作者:孟葆林; 李维琪; 毛建平; 曹旭 中国科学院研究生院; 北京; 100039; 中国科学院新疆理化技术研究所; 乌鲁木齐; 830011; 军事医学科学院放射医学研究所; 北京; 100850
增强型绿色荧光蛋白   人肝癌细胞hepg2   稳定转染克隆   hepg2细胞   表达调控  

摘要:分别从pMD18-T质粒和人基因组DNA扩增出人apoA-I CDS区序列和apoA-I启动子(702bp片段),与pEGFP-N1重组,构成受apoA-I启动子调控的pEGFP-N1质粒和融合蛋白表达质粒,分别转染人肝癌HepG2细胞,以绿色荧光为标志筛选稳定转染系列克隆.用RT-PCR、荧光显微镜、免疫荧光术等鉴定其中一个克隆融合蛋白的表达;分别以胰岛素和葡萄糖刺激物鉴定该克隆的外源apoA-I启动子调控.结果表明:人apoA-I分泌型表达调控肝细胞模型初步建成.

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