首页 期刊 中国生物工程 一种简便高效的人胚胎干细胞转染方法 【正文】

一种简便高效的人胚胎干细胞转染方法

作者:赵明; 尹志华; 蒋星军; 杨旭宇; 姚开泰; 任彩萍 中南大学肿瘤研究所; 长沙; 410078; 中南大学湘雅医院神经外科; 长沙; 410008
人胚胎干细胞   egfp基因   基因转染   稳定表达   稳定转染  

摘要:目的:利用Fugene 6基因转染试剂建立一种简便高效的人胚胎干细胞转染方法,并建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因的人胚胎干细胞系,为人胚胎干细胞研究提供一个非常有用的细胞模型.方法:通过Fugene 6基因转染试剂成功地将EGFP基因转入无饲养层培养的人胚胎干细胞中,嘌呤霉素筛选得到稳定表达EGFP的克隆:利用倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测EGFP在人胚胎干细胞中的表达情况.结果:EGFP瞬时转染效率为30%~40%,稳定转染效率约1/104-5,且稳定转染的人胚胎干细胞均表达EGFP.结论:Fugene 6是一种良好的基因转染试剂,它可以有效地将外源基因转入人胚胎干细胞中,为人胚胎干细胞的转基因研究提供新的实验手段.

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

学术咨询 免费咨询 杂志订阅