首页 期刊 中国生物工程 一种原位示踪外源目的基因表达载体的构建 【正文】

一种原位示踪外源目的基因表达载体的构建

作者:刘琦; 罗阳; 姜莉; 张学 中国医科大学医学基因组学研究室; 卫生部细胞生物学重点实验室; 沈阳; 110001; 中国医科大学医学基因组学研究室; 卫生部细胞生物学重点实验室; 沈阳; 110001; 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传学系医学分子生物学国家重点实验室; 北京; 110005
转染   egfp   ires   脂质体介导   对照组  

摘要:应用分子克隆技术,分别将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)、内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)和编码H-ras基因C端20个氨基酸的DNA(rasc20)片段插入真核表达载体pcDNA3,构建真核重组表达载体并将其命名为pZX.通过脂质体介导将该载体转染人宫颈癌细胞系HeLa,培养过夜后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在细胞内的分布,并与pEGFP-C3质粒DNA转染该细胞系进行比较.结果表明,转染pZX载体的实验组细胞膜发出绿色荧光,而对照组绿色荧光则均匀弥散于整个细胞中,工具性载体pZX已构建成功.

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