摘要：目的研究观察自行构建的siRNA表达载体对柯萨奇病毒B3（CVB3）感染的潜在治疗作用。方法以CVB3聚合酶编码区基因序列为靶点，构建发夹型siRNA真核表达载体pGCsi—U6／GFP／P及与CVB基因组序列无关的阴性对照pGCsi—U6／GFP／N。利用脂质体转染进入Hela细胞后，用CVB3毒株进行攻击，观察感染后Hela细胞病变情况，并用RT—PCR法检测细胞培养上清中的CVB3负链RNA水平。结果构建的表达质粒pGCsi—U6／GFP／P在Hela细胞能够正确表达，其表达产物能够使CVB3基因沉默，并间接抑制了CVB3的复制。结论本实验成功构建了能够抑制CVB3的发夹状siRNA表达质粒，该质粒具有增强细胞抗CVB3感染的能力。

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