摘要：【目的】构建ChREBP基因siRNA表达质粒，干扰ChREBP在原代培养猪脂肪细胞的表达，研究其在葡萄糖诱导脂肪细胞生脂中的作用。【方法】合成4对靶向ChREBP基因的siRNA寡核苷酸，分别连接于pcDNA6．2-GW／EmGFP载体构建siRNA表达质粒，测序验证后，采用脂质体介导法转染从3日龄仔猪皮下脂肪组织分离培养的脂肪细胞，荧光定量RT—PCR检测ChREBP基因沉默效率；以葡萄糖浓度为O-20mmol·L-1的培养液培养转染细胞48h，测定生脂及生脂基因表达变化。【结果】筛选出了1个转染效果好、ChREBP基因沉默效率达85％的SiRNA表达质粒，转染原代培养猪脂肪细胞后，细胞生脂水平及生脂基因ACCl和FASmRNA表达比阴性对照表达质粒转染细胞和未转染细胞显著降低（P〈0．05），且生脂水平不受葡萄糖水平的影响（P〉0．05）。【结论】构建的SiRNA表达质粒能有效干扰猪脂肪细胞ChREBP表达，葡萄糖通过转录因子ChREBP调控猪脂肪细胞生脂及生脂基因表达。

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