摘要：旨在为萱草属植物的EMS诱变提供一种预处理技术方法。以‘红运’萱草带芽愈伤组织为材料,采用高渗透固体培养基(MS+甘露醇36 g/L+山梨醇36 g/L+蔗糖50 g/L)在1.0%EMS半致死剂量诱变前分别进行0、30、60、90 min的渗透胁迫预处理。测定24 h的相对电导率和SOD、POD、CAT酶等生理生化指标;观察统计不同生长时期愈伤组织的生长量、成活率、分化率和再生苗率等;通过40%叶枯病菌粗毒素液选择压筛选获得抗病阳性植株,计算突变体率。实验结果表明:随着胁迫时间的增长,愈伤组织的生长量、成活率、分化率和再生苗率显著下降;24 h时的细胞质膜透性和SOD、CAT酶活性升高、POD酶活性降低。胁迫时长30~60 min时,愈伤组织生长量普遍降低4.5~5.6 g,对愈伤组织成活率、分化率和再生苗率未造成显著影响;突变体率比ck提高了6.34%~9.27%。胁迫时长达90 min时,愈伤组织生长量、成活率、分化率和再生苗率极度降低,通过选择压筛选获得的2株再生苗均为阳性植株。结论:渗透胁迫对EMS诱变愈伤组织的伤害呈叠加效应,随着胁迫时间的延长伤害作用加剧。高渗透固体培养基预处理30~60 min可以作为大花萱草EMS离体诱变提高突变体率的方法。渗透胁迫时间的长短与突变率提高的幅度没有规律性。

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