首页 期刊 中国农学通报 甜菜DAMD-PCR体系的建立及优化 【正文】

甜菜DAMD-PCR体系的建立及优化

作者:兴旺; 童乐怡; 孙燕红; 马龙彪; 吴则东 黑龙江省普通高校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江大学; 哈尔滨150080; 中国农业科学院甜菜研究所/黑龙江大学农作物研究院; 哈尔滨150080; 中国农业科学院北方糖料作物资源与利用重点开放实验室; 哈尔滨150080
甜菜   damd   体系优化   指纹图谱   dna  

摘要:为了建立甜菜DAMD扩增体系,以期利用DAMD引物应用于甜菜品种指纹图谱的构建及分子标记辅助育种。本实验利用单因素变量的方法对甜菜DAMD体系进行优化。同时选用12个甜菜品种,利用优化的体系对25条DAMD引物进行扩增。获得甜菜的最适DAMD体系:总体积为20μL,包含模板DNA 10~80 ng、0.75 U的DNA聚合酶、0.2μL的d NTPs(2.5 mmol/L each)以及2.0μL的引物(10μmol/L)。同时25条引物均扩增出了清晰条带,除了个别引物多态性较差外,其余引物多态性都非常的丰富,其中引物62H(-)就可以把实验中用到的12个甜菜品种全部区分开。由此可见,DAMD引物的扩增效率很高,并且扩增结果稳定,条带清晰,非常适合甜菜品种指纹图谱的构建及遗传多样性分析。

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