摘要：目的:通过从外周血中分离B细胞并进行培养,对外周血中存在的alpha-synuclein(α-syn)自身抗体进行分析,以探索用α-syn自身抗体开发治疗帕金森病(PD)抗体药物的可行性。方法:采集健康捐赠人的外周血并分离外周血B细胞进行培养,对B细胞培养上清进行ELISA结合活性分析,并用硫黄素T(ThT)法检测B细胞培养上清中α-syn自身抗体的生物学活性。结果:细胞培养13 d后,镜检发现B细胞扩增孔数可以达到90%以上,表明B细胞在实验条件下生长良好并能维持抗体分泌能力。ELISA结果表明检测的10530个样品中有48个可以和α-syn单体结合(OD 450>0.5),其中36个可以同时结合α-syn单体和聚合体(OD 450>0.5),并且该36个样品和α-syn家族蛋白β-synuclein以及γ-synuclein无交叉反应,具有α-syn结合特异性。用硫黄素T(ThT)法对该组样品进行的抑制聚合活性检测,结果表明36个样品中有9个样品能够显著性地抑制α-syn单体聚合,并且其中两个样品25G07和55F02的抑制率可以达到50%。结论:可以通过分离培养外周血B细胞获得具有生物学活性的α-syn自身抗体,用作治疗帕金森病的抗体药物研发。

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