摘要：目的:制备抗人前列腺癌特异性抗原(t-PSA)单克隆抗体,建立t-PSA的化学发光CLIA检测方法。方法: t-PSA抗原免疫小鼠后,通过细胞融合、HTS筛选、扩大培养及亲和纯化后得到t-PSA单克隆抗体(mAb),测定抗体亲和力、特异性及表位,最后选择抗不同表位的单克隆抗体建立双抗体夹心 CLIA检测方法。结果:获得4株阳性信号较强的抗人t-PSA的mAb(3-21-1、3-26-1、3-40-1、3-41-1)。用3-21-1 mAb-HRP和3-26-1 mAb-HRP建立的CLIA体系检测范围为0.1~100 ng/ml,最低检测限为 0.09 ng/ml,相对偏差均在±5%之内,与肿瘤标志物CEA、AFP、Myo无交叉反应。与罗氏试剂检测t-PSA结果对比,一致性检验KAPPA系数为0.933,相关系数为0.936,两组数据具有较好的一致性和相关性。结论:本研究成功制备了抗人t-PSA mAb,建立了定量检测t-PSA的双抗体夹心CLIA 方法。

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