首页 期刊 中国免疫学 荧光定量RT-PCR测定人颗粒溶素基因表达水平 【正文】

荧光定量RT-PCR测定人颗粒溶素基因表达水平

作者:钱琤; 陈孙孝; 周晔; 陈波; 蒋廷旺; 吴传勇; 邓安梅; 仲人前 第二军医大学长征医院实验诊断科全军临床免疫中心; 上海200003
颗粒溶素   聚合酶链反应   外周血单个核细胞  

摘要:目的:通过建立荧光定量RT-PCR的方法,检测颗粒溶素(Granulysin,GNLY)mRNA在人外周血单个核细胞(PBMCs)中基因表达的水平.方法:基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pMD18-T-GNLY,建立荧光定量RT-PCR方法,并检测了40名正常健康献血者外周血中GNLY的表达水平.结果:内参18 S rRNA的动态检测范围为10^3~10^8拷贝/μg RNA;而40名正常健康人外周血的PBMCs中均有GNLY mRNA的表达,范围为3.12×10^6~4.32×10^7拷贝/μg RNA,均值为[(2.0±1.3)×10^7]拷贝/μg RNA.结论:建立了人GNLY基因表达水平的荧光定量PCR检测方法,结果准确可靠,为今后进一步研究GNLY mRNA表达水平与感染性疾病免疫机制的相关性研究打下了基础.

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