首页 期刊 中国媒介生物学及控制 TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应检测白纹伊蚊体内登革病毒 【正文】

TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应检测白纹伊蚊体内登革病毒

作者:段金花; 林立丰; 蔡松武; 卢文成; 郑夔; 易建荣 广东省疾病预防控制中心消毒杀虫研究所; 广州510300
白纹伊蚊   taqman   mgb探针   实时聚合酶链反应  

摘要:目的初步研究TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应(TaqMan MGB Real-time PCR)检测白纹伊蚊登革病毒的敏感性,建立一种敏感、特异、重复性好的登革病毒(Dengue virus,DV)鉴定方法。方法在实验室使雌性白纹伊蚊人工感染Den-2型病毒,设不同的感染蚊虫浓度(只/500μl或只/1000μ1)和不同的分组方法(不加未染毒的蚊虫、分别用未染毒的实验室饲养的雌性白纹伊蚊补加到每份标本10、25、50只/组),利用一步法和二步法TaqMan MGB PCR检测,根据荧光信号判断结果。结果二步法TaqMan MGB PCR可检测到标本中感染蚊虫的最低浓度为2只/500μl和3只/1000μl,一步法TaqMan MGB PCR可检测到标本中感染蚊虫的最低浓度为5只/500μl,蚊自身的RNA对登革病毒RNA的检测敏感性并无明显的影响。结论TaqMan MGB探针检测白纹伊蚊体内的DV敏感度高,特异性好,是白纹伊蚊携带登革病毒指数较理想的监测方法,标本较好的处理方法为500μl标本处理液研磨20~30只/组,TaqMan MGB Real-time PCR最好采用二步法。

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