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拉沙病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立

李深伟; 杨柳; 李帅; 张子龙; 张晓航; 田桢干; 李平 上海出入境检验检疫局; 上海200335
  • 拉沙病毒  
  • 免疫荧光法  
  • 真核细胞  
  • 抗体  

摘要:目的建立简便、快速的拉沙病毒IgG抗体检测方法。方法利用293F细胞表达重组拉沙病毒糖蛋白GP1,固相化在腔室玻片上,加入GP1抗血清,最后加入荧光标记的二抗,利用间接免疫荧光法检测拉沙病毒IgG抗体。结果制备了重组拉沙病毒糖蛋白GP1,GP1抗血清效价〉1∶1000000;拉沙病毒IgG抗体间接免疫荧光方法具有专一性强(检测20份健康人血清,无交叉反应),灵敏度较高(抗血清在1∶1000稀释时仍有较强信号)的特点。结论建立了拉沙病毒IgG抗体的快速间接免疫荧光检测方法,可用于口岸拉沙病毒的快速筛查。

  • 2014和2016年登革病毒检测能力验证结果分析

    作者:张丽萍; 张雯雯; 马雪征; 李丽丽; 甄维; 胡孔新 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    目的通过开展登革病毒检测能力验证,不断提高实验室登革病毒的检测水平。方法登革病毒1-4型毒株经严格灭活,经过特异性、敏感性、均匀性、稳定性测试,随机组合成每组5份样品发放。参加能力验证的实验室自行决定采用的核酸提取方法和检测方法,对样品进行定性或/和分型检测。对登革病毒检测结果进行分析。结果 2014和2016年,全国共有126家实验室参加登革病毒检测能力验证,初测满意率为98.4%,2家实验室的结果判定为"定性检测不满意",占全部参加实验室的1.6%,补测后满意率为100.0%。结论我国大部分实验室具备较好的登革病毒实时荧光定量PCR检测能力和质量控制及管理水平,可以很好地为有关部门提供技术支持。

  • 威海地区腹泻致病菌及药敏分析

    作者:刘振波; 卞志伟; 高娟娟; 黄君君 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    目的调查威海地区腹泻患者的致病菌及其药物敏感性,指导国际旅行者用药。方法收集2016—2017年威海市立医院门诊及住院腹泻患者粪便样本2 400份,接种于肠道致病菌选择培养基,对可疑菌落进行纯化,利用微生物鉴定及药敏分析系统鉴定致病菌的种类及其对阿米卡星、头孢噻肟、复方新诺明、庆大霉素、诺氟沙星、头孢唑啉、氨苄西林、环丙沙星8种药物的敏感性。结果在2 400份粪便样本中,有1 105份检出致病菌,其中以弧菌属细菌最多,共837份(75.75%)。其次是志贺菌属,共148份(13.39%);大肠埃希菌属、气单胞菌属、假单胞菌属、沙门菌属及耶尔森菌属合计120份(10.86%)。各菌属致病菌对8种药物的敏感率平均值由高到低依次为阿米卡星95.30%、头孢噻肟89.76%、庆大霉素76.98%、头孢唑啉68.91%、环丙沙星55.79%、复方新诺明55.19%、诺氟沙星33.97%、氨苄西林21.54%。结论威海地区腹泻致病菌主要是弧菌属细菌,大部分致病菌对阿米卡星和头孢噻肟敏感,可作为治疗的首选药物。

  • 山东口岸马达加斯加鼠疫疫情风险评估

    作者:赵风源; 侯伟; 白文兴 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    目的对马达加斯加鼠疫疫情输入山东口岸的风险开展风险评估,制定针对性的鼠疫疫情防控措施。方法运用专家会商法确定风险指标,采用风险矩阵法对山东口岸马达加斯加鼠疫疫情输入事件进行风险评估。结果通过综合分析世界卫生组织的疫情报告、鼠疫的病原学特点、山东口岸病媒生物分布情况、马达加斯加-中国航线情况、马达加斯加-山东航线情况和山东口岸基本情况,认为山东口岸鼠疫疫情发生可能性为3,鼠疫疫情发生的后果严重度为2,风险综合评价指数得分为6,为低风险等级,广泛可接受风险。结论山东口岸输入性鼠疫疫情的风险为低风险等级,但是鼠疫疫情传入的可能性仍然存在,需进一步做好疫情动态风险评估、强化口岸核心能力建设、做好应急储备工作、加强口岸检疫查验和宣传教育等措施,加强马达加斯加鼠疫疫情口岸防控工作。

  • 湛江港口岸卫生检疫风险分析与控制研究

    作者:张韶; 李建新; 陈伟; 戴六寿; 吴卓伟; 李剑锋 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    本文在分析湛江港口岸卫生检疫历史数据的基础上,阐述湛江港口岸卫生检疫的输入性与输出性风险,梳理入境船舶在交通员工健康状况、船舶卫生控制情况、船舶所载货物种类等方面存在的输入性风险因子,并将其分为一般性风险因子和显著性风险因子两大类。其中一般性风险因子对应输入的可能性大小,显著性风险因子对应危害的严重性程度。根据传染病传播与流行情况,以及风险因子的大小,科学设定每种风险因子的风险系数和分值等级,分别计算一般性风险因子与显著性风险因子总评分加权比值,将其分为5个区间。应用风险等级矩阵评估指数表,便可从严重风险、高危风险、中等风险、较低风险4个等级中,判定入境船舶的卫生检疫风险大小,从而合理选择电讯检疫、靠泊检疫、锚地检疫等不同方式进行口岸卫生检疫查验,以达到严格控制入境船舶卫生检疫风险的目的。

  • 2016—2017年乌拉斯台口岸鼠类及其体表寄生蚤调查

    作者:田珊珊; 陈兴华; 顾健; 阿布都·扎伊尔; 马兰章子; 吕新刚; 夏昕; 田锋; 李伟 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    目的了解中蒙边境乌拉斯台口岸地区鼠类种群构成。方法 2016—2017年5、7、9月在中蒙边境乌拉斯台口岸的生活区、联检大厅周围、野外、边境区,采用夹夜法捕鼠,对鼠类及其体表寄生蚤进行形态学鉴定。取鼠类的脾脏和肺组织样本,用PCR方法检测鼠疫耶尔森菌。结果 2016—2017年,共捕获182只鼠类,其中黄兔尾鼠为优势种,捕获60只,占33.0%,其次是小家鼠(30.7%)。共采集体表寄生蚤213匹,鉴定为4科6属8种,其中优势种为方形黄鼠蚤阿尔泰亚种,占34.5%。所有鼠类均未检测到鼠疫耶尔森菌。结论今后应密切监测中蒙边境地区病媒生物种群构成及变化,更好地开展病媒生物及虫媒传染病防控。

  • 2014—2015年甘肃省朝觐人群慢性病患病情况分析

    作者:王莉; 张芳; 尹海萍; 巩伟兵; 赵志亮; 刘芳 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    目的分析甘肃口岸朝觐人员高血压等慢性病的患病情况,为甘肃地区朝觐人员的健康指导提供依据。方法对2014—2015年甘肃口岸朝觐人员进行常规体格检查,统计分析血糖、血压、腹部B超和心电图的检查结果。结果 2014—2015年,在甘肃国际旅行卫生保健中心体检的6 109名朝觐人员中,空腹血糖异常2 796例,检出率45.77%;高血压2 527例,检出率41.37%;腹部B超检查异常1 111例,检出率18.19%;心电图异常578例,检出率9.46%。统计分析发现,不同性别及不同年龄高血压等慢性病检出率差异有统计学意义,年龄越大,检出率越高。结论在今后朝觐人员体检工作中应重点关注出国朝觐人员的慢性病患病情况,为朝觐人员的健康管理提供指导。

  • 上林县赴非洲务工人员艾滋病相关知识知晓情况调查

    作者:陈建丰; 黄晓明; 熊翠红; 罗继全; 覃韦基; 韦幼桃; 覃雪玉 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    目的了解广西壮族自治区上林县赴非洲务工人员艾滋病相关知识的知晓情况,为制定艾滋病防治措施提供科学依据。方法对2014—2017年上林县赴非洲务工的返乡人员,进行面对面访谈式问卷调查;检测艾滋病病毒(HIV)、丙肝病毒(HCV)和梅毒螺旋体抗体。结果在赴加纳、咯麦隆等非洲国家的务工返乡人员中,HIV、HCV和梅毒螺旋体抗体阳性率分别为0(0/2395)、0.96%(23/2395)和0.33%(8/2395);了解HIV可以经性行为、血液、共用注射器、母婴途径传播的分别占70.40%、63.47%、45.68%和49.27%。38.71%务工人员不知道正确使用安全套能预防艾滋病的传播。结论外出务工人员中存在高危性行为,艾滋病预防知识缺乏,应加强健康教育和行为干预。

  • 口岸防御生物与化学恐怖的技术挑战与对策

    作者:邓晓东; 刘杨; 常晓松; 何纬; 田绿波; 樊学军; 张薇薇 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    为防御生物与化学恐怖袭击,口岸必须建立综合、多层次、网络化系统,对袭击进行快速、高效的检测、确认和响应。本文通过分析生物与化学恐怖因子的特点,找出防控生物与化学恐怖袭击过程中的主要技术难点,发掘口岸应对生物与化学恐怖袭击的策略,发现口岸生物与化学反恐的侦检资源须在口岸现场与实验室之间梯次配置,并在随时跟进国内外生化反恐技术进步的过程中逐步完善。

  • 中国卫生检疫标准化及其技术性贸易措施特征

    作者:聂维忠; 张治富 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    随着国际贸易的不断繁荣,以技术法规、标准和合格评定为表现形式的技术性贸易措施逐渐成为各国特别是发达国家保护本国产业和促进对外贸易发展的重要手段。卫生检疫标准是国家标准体系的重要组成部分,是对卫生检疫法律法规的技术性补充和细化,应不断适应技术性贸易措施各项要求。随着卫生检疫标准化向技术性贸易措施转变,将成为保障我国经济利益、服务外贸发展和国家安全的重要举措。

  • 珠海拱北口岸检疫查验机制的创新

    作者:李哲; 李书香; 戴瑛; 王苑; 王媛慧 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    为满足新形势的需求,珠海出入境检验检疫局通过推进旅检通道前后台分离查验实施卫生检疫查验模式改革,首创"人-机-犬-仪""四位一体"携带物查验模式,推进通关一体化和检验检疫一体化改革,配合推进电子口岸建设和"一站式"系统升级改造等查验机制创新措施,实现口岸检疫查验通关效率有效提高、传染病检出率大幅提升、执法公信力不断增强。总结查验机制创新的成功经验,形成可复制、可推广的做法,为国内同类型的陆路口岸提供借鉴。

  • 影响结核分枝杆菌全基因组测序结果的因素分析

    作者:陈钰; 罗力涵; 李莎 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    耐药结核分枝杆菌是困扰结核病临床治疗的难题。结核分枝杆菌全基因组测序技术可以全方位分析导致耐药的基因突变。随着测序平台和快速分析软件的发展,全基因组测序逐渐成为指导临床用药的有力工具,但是对临床样本进行直接测序进而获得耐药谱仍然面临诸多挑战。本文对结核分枝杆菌DNA提取以及痰液处理方案做一综述,并建议制定一套标准、高效的结核分枝杆菌DNA提取规范。

  • 辽宁口岸发现首例输入性三日疟病例

    作者:韩鹏宇; 滕艳霞; 于晓丽; 毕秀欣 期刊:《中国国境卫生检疫》 2018年第02期

    疟疾是一种蚊媒传染病,按照疟原虫的不同分为间日疟、三日疟、恶性疟和卵形疟共4种类型。疟疾在全球99个国家流行,截止到2010年,全球约有2.19亿人患疟疾,其中81%的病例发生在非洲,撒哈拉以南地区是疟疾重度流行区,60%的病例出现在尼日利亚、刚果民主共和国、莫桑比克、印度~([1])。疟疾的主要传播途径为雌性按蚊叮咬,按蚊叮咬患者或者带虫者的血液后,再叮咬健康人将疟原虫传给健康人。丹东口岸有大量赴非洲劳务人员出入境,沿江有中华按蚊滋生,给疟疾防控工作造成困难。

  • 一种黄热病毒反转录恒温热隔绝式PCR检测方法

    作者:赵俊华; 李伟刚; 杜田; 苏影; 汪海波; 涂承宁; 杨泽; 莫秋华 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    目的建立能在野外或现场应用的黄热病毒反转录恒温热隔绝式PCR(reverse transcription-insulated isothermal PCR,RT-iiPCR)快速检测方法。方法针对黄热病毒基因组5’UTR保守区设计检测引物和TaqMan-MGB探针,优化引物、探针、Taq酶、反转录酶和PCR增强剂等各组分的浓度,利用分析平台,建立黄热病毒RT-iiPCR检测方法,评价方法的稳定性、特异性、灵敏度和检测限等指标。结果建立了稳定可靠的黄热病毒RT-iiPCR检测方法,在分析平台上只需一键操作即可在58 min内完成检测并自动报告结果。性能评价试验显示该方法稳定性好,特异性和灵敏度分别达到100.00%和92.31%,检测下限≥1 000拷贝。结论率先建立了黄热病毒RT-iiPCR检测方法,该方法简便实用,适合于现场快速检测。

  • 一种新型泡沫洗消剂对生物毒剂的消毒效果研究

    作者:慈颖; 杨燕; 王思; 王静; 张晓龙; 于珊珊 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    目的针对生物、化学毒剂的环境污染风险,研究一种泡沫洗消剂,评价其对生物毒剂的消毒效果。方法采用过氧化氢和碳酸氢钠联合作为强亲核试剂,作为泡沫洗消剂主要成分,以枯草杆菌黑色变种芽胞作为炭疽杆菌芽胞的模拟物,评价泡沫洗消剂的浓度、过氧化氢与碳酸氢钠配比、环境温度、洗消时间对生物毒剂模拟物的洗消效率。结果环境温度为25℃,过氧化氢与碳酸氢钠配比为1∶1,浓度为10 g/m~2的泡沫洗消剂对炭疽杆菌芽胞的模拟物在15 min内杀灭率可达到99.9%。结论该泡沫洗消剂对生物毒剂展示出高效的洗消能力。

  • 2015—2017年度青岛口岸输入性流感监测分析

    作者:张瑾; 徐翮飞; 薛晓宁; 杜辉; 张娟; 朱可; 陈晓光 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    目的对青岛口岸输入性流感病例的流行病学特征进行分析,为流感的监测及其疫情防控提供依据。方法2015—2017年采集青岛口岸有咳嗽、咽痛、发热(体温≥37℃)等症状的入境人员的鼻咽拭子样本,采用实时荧光RTPCR法对样本进行流感病毒核酸检测和分型。运用描述流行病学方法对流感病例及流感病毒病原学监测数据进行分析。结果 2015—2017年,青岛口岸对1 612名疑似上呼吸道感染的入境人员采集了鼻咽拭子,检出流感病例308例,阳性率为19.11%。3个监测年度青岛口岸入境人群流感发病率分别为6.41例/10万,3.75例/10万和8.53例/10万,流感病例均呈冬春季高发的季节性变化。3个监测年度均为甲型H3N2、H1N1(2009)流感和乙型流感共同流行,2017年12月—2018年2月输入性流感检出率达到近3年最高,Yamagate系乙型流感病毒是2015和2017监测年度主要的乙型流感病毒流行株。检出的流感病例主要来自韩国、日本和泰国,分别占总病例的37.66%、21.10%、12.01%。男性发病率明显高于女性,不同性别检出率差异有统计学意义。结论 2015—2017年,青岛口岸输入性流感为甲型H3N2流感、H1N1(2009)流感和乙型流感交替流行,与全球流感监测网络公布的数据一致。

  • 江苏省淮安市啮齿动物感染正汉城病毒的基因特征研究

    作者:燕清丽; 行岳真; 李兵兵; 庞艺秀; 何芳; 刘纯成; 赵怀荣; 杨鹏飞; 姚海波; 何南江 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    目的了解淮安市啮齿动物携带正汉城病毒(Seoul orthohantavirus,SEOV)的分布特点及SEOV的种群遗传多样性特征,为肾综合征出血热防治提供科学依据。方法用夹夜法采集啮齿动物,提取肺组织RNA,采用PCR法扩增SEOV的S基因,对S基因序列进行系统进化及遗传多样性分析。结果在淮安市捕获鼠类4种125只,褐家鼠(Rattus norvegicus)为优势鼠种,构成比为62.4%。褐家鼠携带的SEOV(XuyiRn43、XuyiRn68)S基因片段的核苷酸序列同源性为98.1%,推导的氨基酸序列同源性为97.5%,与江苏省赣榆株(GanyuRn20、GanyuRn66及GanyuRn137)的核苷酸序列同源性为98.4%~98.7%,推导的氨基酸序列同源性为96.7%~99.2%。系统进化分析显示淮安市褐家鼠携带的SEOV的基因亚型为S1型,有2个单倍型。结论褐家鼠为淮安市优势鼠种,携带的SEOV为S1基因亚型。

  • 中山神湾港鼠形动物及体表寄生虫监测

    作者:陈利伟; 刘德星; 叶雅芳; 李婷婷; 叶丽芬; 岳巧云 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    目的了解中山神湾港口岸地区鼠形动物及其体表寄生虫的种类、构成和鼠形动物携带病原体情况。方法2017年5月—2018年6月,在神湾港货运码头区及神湾游艇码头区两个监测地点,采用笼夜法捕鼠,梳刷法采集鼠体表寄生虫;无菌解剖取鼠肺、肝、脾和肾脏组织,采用核酸检测方法检测7种病原体的携带情况。结果共捕获鼠形动物3种69只,包括臭鼩鼱(Suncus murinus)58只、黄胸鼠(Rattus tanezumi)9只、卡氏小鼠(Mus caroli)2只;平均鼠密度为3.89%,鼠密度季节消长明显,密度高峰期出现在7~8月及3~4月;鼠形动物体表检出吸虱12只、适存病蚤(Nosopsyllus nicanus)2只、粒形硬蜱(lxodes granulatus)95只、螨151只,其中毒厉螨(Laelaps echidninus)3只、地里纤恙螨(Leptotrombidium deliense) 148只。鼠形动物染虱率、染蚤率、染蜱率、染螨率分别为2.90%、1.45%、20.29%、4.35%。检出汉坦病毒、致病性钩端螺旋体、巴尔通体核酸,阳性率分别为2.90%、4.35%、11.59%;土拉菌、鼠疫耶尔森菌、恙虫病东方体、伯氏疏螺旋体核酸检测为阴性。结论神湾港口岸地区鼠密度较高,鼠形动物存在蜱、螨、蚤类寄生,鼠形动物中检测出汉坦病毒、致病性钩端螺旋体、巴尔通体感染,应加强防控。

  • 青岛未见分布蝇种—天仙子泉蝇的鉴定

    作者:徐颖; 薛晓宁; 张娟; 张瑾; 徐翮飞; 滕新栋 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    目的对青岛胶东国际机场捕获的2只蝇类进行形态和DNA条形码鉴定。方法对捕获的蝇类,先进行形态学鉴定,然后利用DNA条形码技术,以COI基因为目的基因进行扩增和测序,分析物种同源性并构建系统进化树。结果2只蝇类样本形态学鉴定为花蝇科,无法鉴定到种。通过DNA条形码鉴定和序列比对,2只蝇样本的序列与BOLD数据库中天仙子泉蝇Pegomya hyoscyami的COI基因上一段长达658 bp的序列同源性高达100%,判断为天仙子泉蝇。结论在青岛机场捕获的蝇类为天仙子泉蝇,是青岛口岸首次发现。

  • 梅毒血清学ELISA、TRUST检测效果评价

    作者:毛成荣 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

  • TRUST、ELISA及TPPA在梅毒血清学监测中的应用效果评价

    作者:陈嵘; 林小红; 黎云; 曾俊 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

  • 本刊对来稿作者署名的要求

    作者: 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    一、作者署名文章作者姓名在题目下按序排列。排序应在投稿前由全体作者共同讨论确定,投稿后不应再作变动。作者应同时具有以下4项条件:(1)参与论文选题和设计,或参与资料分析与解释;(2)起草或修改论文中关键性理论或其他主要内容;(3)除了负责本人的研究贡献外,同意对研究工作各方面的诚信问题负责。研究类文章的作者不应超过10名,综述作者不超过3名,短篇报道作者不超过4名。

  • 国境口岸病原体检测新方向—重组酶聚合酶扩增技术

    作者:袁伟; 廖凌; 童淑梅; 康晓平 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    作为一项快速、高效、便捷的等温核酸扩增技术,重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术运用在病原体检测研究中,表现出灵敏度高、特异度好、用时短、应用广泛、操作简单等优势,有望应用于口岸病原体现场快速检测。本文在对比几种等温核酸扩增技术的基础上,重点介绍RPA技术原理和方法,以几种国境口岸重点关注病原体为例,探讨RPA在病原体检测、生物反恐、移动实验室方面的研究进展,为口岸卫生检疫工作提供新的技术参考和方向。

  • 中国国境卫生检疫杂志

    作者: 期刊:《中国国境卫生检疫》 2019年第04期

    《中国国境卫生检疫杂志》创刊于1978年,是经国家新闻出版总署批准,由国家质量监督检验检疫总局主管,中国检验检疫科学研究院主办,国内外公开发行的国家级学术期刊。《中国国境卫生检疫杂志》的办刊宗旨为:防止国际间传染病的传播蔓延,保护人体健康,为维护口岸卫生安全,促进国际贸易与友好往来,发展社会主义经济服务。《中国国境卫生检疫杂志》的特色为:理论性与实用性结合,专业性与普及性结合。

中国国境卫生检疫

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