摘要：目的建立快速、敏感、特异的逆转录重组酶介导（Reverse—transcription recombinase—aid assay，RT—RAA）核酸检测方法，用于中东呼吸综合征冠状病毒（MERS—CoV）的检测。方法根据MERS—CoV基因的保守序列设计并合成特异性RAA引物及探针。通过条件优化，以10倍系列稀释经第3代慢病毒载体构建的假病毒颗粒阳性标准品为模板，进行RT—RAA扩增，并进行特异性、敏感性以及临床样本检测。结果建立的RT—RAA方法检测MERS—CoV假病毒颗粒阳性标准品的灵敏度为10拷贝/ml，高于实时荧光RT—PCR方法（102拷贝／ml）；用该方法检测MERS—CoV假病毒颗粒有明显扩增．而甲型H1N1流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒等4种呼吸道病毒的检测均为阴性：检测我国首例输入性MERS病例的临床样本及1例英国QCMD协会的室间质评阳性灭活样本均能检出，与实际结果相符。检测时间（20min）大大低于实时荧光RT—PCR（90min）。结论建立的MERS—CoVRT—RAA检测方法灵敏、特异、快速，可用于MERS—CoV感染的现场快速检测和流行病学调查。

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