首页 期刊 中国国境卫生检疫 结核分枝杆菌通用检测方法的建立及应用 【正文】

结核分枝杆菌通用检测方法的建立及应用

作者:孙菲; 贺理; 戴佩希; 万向阳; 李丹; 唐连飞 湖南国际旅行卫生保健中心; 湖南长沙410100; 中南大学湘雅医学院; 河南中医药大学; 江苏硕世生物科技有限公司; 湖南出入境检验检疫局
结核分枝杆菌   细胞色素氧化酶   荧光定量pcr  

摘要:目的 建立一种快速检测结核分枝杆菌的方法,并探讨其临床应用价值。方法 以结核分枝杆菌细胞色素氧化酶(CYP141)基因为靶点设计多对引物和探针,用BLAST软件分析其特异性,优化PCR反应条件,用国家标准品(阴性参考品15份、阳性参考品15份、最低检出量参考品4份及重复参考品10份)和124份经培养鉴定的临床样本(结核分枝杆菌阳性75份)验证方法的可靠性和临床应用价值。结果 国家阴性和阳性参考品的符合率均为100%,最低检出量参考品为不高于1×10^2cfu/ml;10份重复参考品均呈阳性,对临床样本检测的灵敏性和特异性分别为96.00%、97.96%,总符合率为96.77%,一致性好(Kappa值=0.933;χ2=104.21,P〈0.001)。结论 建立了结核分枝杆菌通用型核酸检测方法,适用于卫生检疫系统和临床实验室应用。

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