首页 期刊 中国国境卫生检疫 NLRP3基因单核苷酸多态性TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立 【正文】

NLRP3基因单核苷酸多态性TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立

作者:刘胜牙; 朱玉兰; 甄胜西; 谢聪贤; 李微; 刘健平 深圳国际旅行卫生保健中心; 广东深圳518033; 深圳市检验检疫科学研究院; 深圳市疾病预防控制中心
taqman探针   实时荧光pcr   单核苷酸多态性   nod样受体蛋白3  

摘要:目的建立以Taq Man探针实时荧光PCR技术为基础的核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(Nucleotide-binding oligomerization domain,Leucine rich Repeat and Pyrin domain containing,NLRP3)基因单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)检测方法。方法以20份健康人血液样本为对象,选择NLRP3基因的两个SNP位点(rs3806265和rs35829419),针对每个位点分别设计1对PCR引物和2条Taq Man探针,进行实时荧光PCR扩增,对SNP位点进行分型。用常规PCR和基因测序的方法对Taq Man探针实时荧光PCR分型的结果进行验证。结果用建立的Taq Man探针实时荧光PCR分型法对20份样本进行检测,其中rs3806265位点发现TT基因型3份,TC基因型8份,CC基因型9份;rs35829419位点发现CC基因型20份,无AC和AA基因型。分型结果与常规PCR及基因测序分型方法完全一致。结论基于Taq Man探针技术的实时荧光PCR方法简单、快速,可实现对NLRP3基因位点的分型检测。

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