首页 期刊 中国国境卫生检疫 鼠疫耶尔森氏菌三色荧光定量PCR检测方法的建立 【正文】

鼠疫耶尔森氏菌三色荧光定量PCR检测方法的建立

作者:潘光合 谭勇 吴文旺 甘洁 梁亮 覃杨光 王鸣柳 万道正 蓝翊文 梁中平 广西出入境检验检疫局 广西南宁530021 凭祥出入境检验检疫局 广西壮族自治区疾病预防控制中心
三色荧光   定量pcr方法   鼠疫耶尔森氏菌   检测  

摘要:目的建立一种三色荧光定量PCR检测鼠疫耶尔森氏菌的方法。方法根据鼠疫耶尔森氏菌pPCP1质粒上的pla基因、编码FI抗原在pMTI质粒上的cqf1基因以及菌体染色体上的3a基因序列,设计特异性的引物和不同荧光标记的Taqman荧光探针,优化反应体系和扩增条件,考察该方法检测的敏感度、特异性、重复性和稳定性.最终建立三色荧光定量PCR检测方法。结果本研究所建立的方法对鼠疫耶尔森氏菌DNA的扩增效率高,最低检出限为1×10^2copiesdrrd,特异性高,重复性的变异系数在合理范围内,稳定性好。结论建立了一种同时检测鼠疫耶尔森氏菌pla、caf1和3a基因的三色荧光定量PCR方法,该方法敏感度和特异性高,能够实现快速检测的目的。

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