首页 期刊 中国国境卫生检疫 拉克罗斯病毒和雪靴野兔病毒双重RT-PCR方法的建立 【正文】

拉克罗斯病毒和雪靴野兔病毒双重RT-PCR方法的建立

作者:白红岩 孙肖红 林二妹 陈倩 甄维 徐宝梁 中国检验检疫科学研究院 北京100123
拉克罗斯病毒   雪靴野兔病毒   检测   方法  

摘要:目的建立针对拉克罗斯病毒(LAC)和雪靴野兔病毒(SSH)的双重RT—PCR检测方法。方法分别针对LAC和SSH病毒的S基因设计2对特异性引物,建立同时检测LAC和SSH的双重RT—PCR方法。以黄病毒属的黄热病毒(YFV)、库京病毒(KUNV)、登革病毒(DENV)、乙型脑炎病毒(JEV),布尼亚病毒属的塔希纳病毒(TAHV)和甲病毒属韵巴马哈森林病毒(BFV)、玛雅罗病毒(MAYV)、盖塔病毒(GETV)为模板验证方法的特异性,以不同拷贝数的病毒RNA检测该方法的敏感性。结果建立的双重RT-PCR方法能同时扩增到LAC和SSH的目的片段:敏感度分别达到LAC1.41×10^5copies/μl,SSH5.6×10^4copies/μl;与YFV、KUNV、BFV、MAYV无交叉反应。结论建立了双重RT—PCR方法,可用于LAC和SSH病毒的快速检测。

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