首页 期刊 中国国境卫生检疫 新型液相芯片复合检测5种鼠传病原体方法的建立 【正文】

新型液相芯片复合检测5种鼠传病原体方法的建立

作者:王旺 杨宇 王静 赵婷婷 中国检验检疫科学研究院卫生检疫研究所 北京100123
液相芯片   鼠传病原体   复合检测   标签  

摘要:目的建立一种能同时检测5种鼠传病原体:流行性出血热病毒(Epidemic hemorrhagic fever,EHF)、斑疹伤寒立克次体(Rickettsia typhi,TY1)、鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis,YP)、恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi,RST)、钩端螺旋体(Leptospira,Lep)的液相芯片多重检测方法;方法针对5种病原的全基因组序列,分别设计特异性引物,并将上游引物5’端分别偶联一些特定的核酸片段作为标签(TAG),下游引物5’端标记生物素,PCR扩增后产物与微球进行杂交,最后利用液相芯片检测系统分析结果。结果建立的方法能同时完成对5种病原体Bio-plex100病原体及其中任何1种的检测,特异性好,灵敏度最低可达3 fg/test。结论通过利用偶联有TAG及生物素的引物对,成功建立了可同时检测5种鼠传病原的液相芯片检测方法,具有较高的灵敏度和特异性。该方法对于鼠传病原体的检测具有较好的应用前景。

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