首页 期刊 中国国境卫生检疫 病毒双重荧光RT-PCR检测方法 【正文】

病毒双重荧光RT-PCR检测方法

作者:杨宇 刘丽娟 赵婷婷 李辉 王莎莎 徐焕州 杨鹏飞 王旺 孙肖红 王静 中国检验检疫科学研究院卫生检疫研究所 北京100123 上海辉睿生物科技有限公司
实时荧光pcr   检测   交叉反应  

摘要:目的为快速检测病毒,防控疫情的输入,建立一种快速的双重实时荧光RT-PCR检测方法。方法对WHO公布的单重实时荧光RT-PCR检测引物和探针进行重新设计和优化,建立双重荧光RT-PCR反应体系,分别采用羧基荧光素(FAM)和绿色荧光蛋白(VIC)荧光基团标记探针,实现双基因的同时检测。结果经优化的双重实时荧光RT-PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒检测灵敏度为31拷贝/μl,检测健康和普通发热人员咽拭子以及流感病毒无交叉反应。结论建立了双重实时荧光RT-PCR快速检测方法,提高检测效率和准确度的同时降低了成本,可用于病毒的快速应急检测。

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