摘要：[目的]建立一种检测进出境环保用微生物菌剂中嗜酸氧化亚铁硫杆菌（acidithiobacillus ferrooxidans,A.ferrooxidans）的实时荧光定量PCR方法。[方法]用9K培养基培养A.ferrooxidans标准菌株A.ferrooxidans ATCC23270,并提取基因组DNA作模板;根据GenBank中嗜酸氧化亚铁硫杆菌的16S基因序列设计合成引物和探针,用含有101 bp扩增目标产物的pGEM-T Easy载体质粒为阳性对照,构建标准曲线,建立荧光定量PCR检测方法,并进行方法学的评估。[结果]成功建立了嗜酸氧化亚铁硫杆菌的荧光定量PCR检测方法,该方法对嗜酸硫杆菌属中嗜酸氧化硫硫杆菌（Acidithiobacillus thiooxidans,A.thiooxidans）和嗜酸喜温硫杆菌（Acidithiobacillus caldus,A.caldus）无交叉反应;最少可检测到100个阳性质粒,说明有很好的敏感性;试验内变异系数为0.32%,具有很好的重复性。[结论]建立的嗜酸氧化亚铁硫杆菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法特异性和灵敏度高、重复性好,可作为嗜酸氧化亚铁硫杆菌高通量的快速检测方法。

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