摘要:[目的]构建结核杆菌H37RV株HSP65基因与IL-12基因的共表达载体pVIVO2-HSP65-IL-12,并研究其在Vero—E6细胞内表达的可行性,为新一代结核多价DNA疫苗寻找理论依据。[方法]采用PCR技术,从培养的结核杆菌H37RV中抽提HSP65基因,克隆到pVIVO2-MCS上的一个多克隆位点,构建pVIVO2-HSP65,将质粒pORF—IL-12上的IL-12基因经双酶切后,亚克隆到pVIVO2-HSP65上,构建成共表达载体pVIVO2-HSP65-IL-12。并经XbaⅠ/AvrⅡ和NcoⅠ/NheⅠ进行双酶切和测序鉴定;用间接免疫荧光法(IFA)检测HSP65和mIL-12基因在Vero—E6细胞中的表达。[结果]双酶切和测序分析证明HSP65基因和mIL-12基因成功克隆到pVIVO2-MCS上,且方向正确,序列无突变;间接免疫荧光试验结果为阳性。[结论]共表达载体pVIVO2-HSP65-IL-12构建成功,且pVIVO2-HSP65-IL-12可在Vero—E6细胞中获得共表达。
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社
热门期刊服务
中华结核和呼吸 结核与肺部疾病 结核病健康教育 结核病与胸部肿瘤 结核病与肺部健康 国际结核病与肺部疾病 世界中西医结合 中西医结合 中国中西医结合 深圳中西医结合 中西医结合学报 中西医结合研究相关文章
结核病工作计划