首页 期刊 中国国境卫生检疫 2种免疫层析技术用于4种传染病及其病原体检测的研究 【正文】

2种免疫层析技术用于4种传染病及其病原体检测的研究

作者:王静; 胡孔新; 李伟; 陈维娜; 姚李四; 侯友松; 周蕾; 闫中强; 杨瑞馥 中国检验检疫科学研究院; 北京100025; 军事医学科学院微生物流行病研究所
炭疽杆菌芽孢   鼠疫杆菌   肠出血性大肠埃希菌o157   sars病毒   免疫层析法  

摘要:[目的]寻求能够快速定性/定量检测4种传染病及其病原体的试验方法。[方法]应用双抗体夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测炭疽杆菌芽孢(以下简称炭疽芽孢)、鼠疫杆菌、肠出血性大肠埃希菌O157:H7(以下简称EHEC O157),评价方法的灵敏性、特异性。通过分别检测模拟掺入3种菌/芽孢的“白色粉末”和检测3种细菌的强毒株,评价在实际环境样品检测中的应用。应用双抗原夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测鼠疫F1抗体、SARS病毒抗体,检测239份青海鼠疫疫区人员血清、1236份新疆鼠疫疫源地鼠血清,检测18份恢复期SARS病人血清和9份健康对照者血清,以及206份出入境健康人员血清,考核2种检测抗体的方法在实际样品检测中的应用。通过比较炭疽杆菌、鼠疫杆菌、大肠埃希菌O157以及鼠疫杆菌抗体、SARS病毒抗体的胶体金免疫层析方法、UCP免疫层析方法,比较我们建立的2套系统与加拿大RAMP系统检测炭疽杆菌的能力。[结果]UCP免疫层析方法能在35min内完成检测,炭疽芽孢检测掺入“白色粉末”的样品灵敏性为1×10^4cfu/test,炭疽芽孢最低检测限为1×10^5cfu/ml(原溶液芽孢浓度),多种不同的芽孢菌及其它细菌共38种54株检测说明该法特异性良好,仅与腊样芽孢杆菌有交叉反应,特异性为97%;鼠疫杆菌检测灵敏性为5×10^4cfu/ml,最低检测菌数为5×10^3cfu/test,在10^7cfu/ml水平上未发现与30余种细菌有交叉反应,包括最近缘假结核耶尔森菌;EHEC O157检测灵敏性为1×10^3cfu/ml,仅与弗氏枸橼酸杆菌有交叉反应,特异性为98%。胶体金免疫层析方法能在10min内完成检测,炭疽芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O157检测灵敏度分别为1×10^6cfu/ml、1×10^5cfu/ml、1×10^5cfu/ml,“白色粉末”等环境样品最�

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