摘要：目的:以腺病毒(Ad-CMV)介导钙离子ATP酶基因(sarcoplasmic reticulum Ca2+ -ATPase,SERCa2a)转染骨髓间充质干细胞(Bone marrow msenchymal stem cells,BMSCs),测定表达产物,为心力衰竭的细胞移植和基因治疗提供实验基础.方法:体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,用已构建好的Ad5-CMV-SERCa2a真核载体进行转染.通过流式细胞仪检测转染效率.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、West-ern杂交等方法检测SERCa2amRNA和蛋白质的表达.结果:Ad5-CMV-SERCa2a对BMC的转染率为80%左右,没有明显的细胞毒性反应.RT-PCR检测到SERCa2a,Western杂交确定SERCa2a蛋白表达.结论:腺病毒载体可有效地介导SERCa2a基因转染BMC,并表达SERCa2a蛋白,为基因治疗心力衰竭的研究奠定了基础.

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